Агар маннито-солевой, 500 г, Conda

Среда для селективного выделения и подсчета патогенных стафилококков
Формула в граммах на литр
• Хлорид натрия: 75,0
• Пептоновая смесь (панкреатический гидролизат казеина и пептический перевар животной ткани 1:1): 10,0
• D-маннит: 10,0
• Мясной экстракт: 1,0
• Феноловый красный: 0,025
• Бактериологический агар: 15,0
• Конечная величина pH 7,4±0,2 при 25°C

Приготовление
Развести 111 г среды в 1 литре дистиллированной воды. Тщательно перемешать и нагреть. Часто помешивая, довести до кипения. Кипятить в течение минуты до полного растворения. Стерилизовать 15 минут при 121°C. Охладить до 45–50°C, тщательно перемешать и разлить в чашки Петри. Готовая среда должна быть красного цвета и храниться при 8–15°C.

Использование
Агар маннит-солевой – селективная среда, которая готовится в соответствии с рекомендациями Чапмена для выделения предположительных патогенных стафилококков. Большинство других бактерий ингибируются высокой концентрацией хлорида натрия.

Пептоновая смесь и мясной экстракт являются источниками питательных веществ, необходимых для роста микроорганизмов: азота, витаминов, минеральных солей и аминокислот. Маннит – углеводный источник энергии; феноловый красный – индикатор pH. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.
В результате утилизации маннита бактериями образуются кислые продукты, которые изменяют цвет среды с розового на желтый. Благодаря высокой концентрации хлорида натрия среду можно инокулировать большим количеством материала.

Европейская Фармакопея рекомендует следующий метод обнаружения Staphylococcus aureus. После инку­бации при 30–35°C в течение 18–24 часов в Бульоне триптиказеино-соевом (кат. № 1224) произвести посев на чашки с Агаром манит-солевым, инкубировать при 30–35°C в течение 18–72 часов для анализа стимуляции роста. В качестве негативного контроля также инокулировать и инкубировать Escherichia coli АТСС 8739. Маннит-ферментирующие патогенные стафилококки будут представлены большими колониями, окруженными желтой зоной. Непатогенные стафилококки имеют вид небольших колоний, окруженных красным либо фиолетовым ореолом. На возможное присутствие S. aureus указывает присутствие желтых/белых колоний, окруженных желтой зоной. Для подтверждения необходимо проведение идентификационного теста.

Добавление 5% Эмульсии яичного желтка (кат. № 5152) позволяет обнаружить липазную активность стафилококков, а также ферментацию маннита. Высокая концентрация соли в среде осветляет эмульсию яич­ного желтка, и образование липазы обнаруживается посредством образования желтой матовой зоны вокруг колоний стафилококков. Это явление наряду с положительным коагулазным тестом, подтверждает, что иссле­дуемые микроорганизмы являются патогенными стафилококками.

Инокулировать и инкубировать при 35±2°C и наблюдать через 18–24 часа и еще раз после 48 часов.

Микробиологический тест
Следующие результаты были получены при использовании среды на тестовых культурах после инкубации при температуре 35±2°C и наблюдались через 18–24 часа и через 48 часов.

Микроорганизмы
1. Escherichia coli ATCC 25922
2. Escherichia coli ATCC 8739*
3. Enterobacter aerogenes ATCC 13048
4. Staphylococcus aureus ATCC 25923
5. Staphylococcus aureus ATCC 6538*
6. Staphylococcus epidermidis ATCC 12228
7. Staphylococcus epidermidis ATCC 14990

Рост:
1. Ингибируется
2. Ингибируется
3. Ингибируется
4. Хороший
5. Хороший
6. Умеренный
7. Хороший

Цвет колонии
1. –
2. –
3. –
4. Желтый
5. Желтый
6. Красный
7. Красный

*Согласно рекомендациям Европейской Фармакопеи 7.0 инкубировать при 30–35°C в течение 18–72 часов.