Среда для определения чувствительности к антибиотикам и сульфамидам, а также для первичного выделения нейссерий и других патогенов из клиничесих образцов
Формула в граммах на литр
Кислый казеиновый пептон (H) 17,5 Вытяжка из говядины 2,0
Крахмал 1,5 Бактериологический агар 17,0
Конечная величина pH 7,4±0,2 при 25°C
Приготовление
Развести 38 г среды в 1 литре дистиллированной воды. Тщательно перемешать и нагреть. Часто помешивая, довести до кипения. Кипятить минуту до полного растворения. Стерилизовать 15 минут при 121°C. Охладить до 45 или 50°C и при необходимости добавить дефибринированную кровь. Кровяная смесь должна быть доведена до шоколадного цвета путем нагревания до 80°C в течение 10 мин, если требуется рост Neisseria spp. НЕ ПЕРЕГРЕВАТЬ! Для повторного расплавления готовой среды нагревать как можно меньшее время. Готовая среда имеет янтарную окраску, слегка опалесцирует, должна храниться при 8–15°C.
Использование
Агар Мюллера-Хинтона совместно с Бульоном Мюллера-Хинтона (кат. № 1214) используется, в основном, для тестирования антимикробной чувствительности быстрорастущих аэробных организмов из клинических образцов. При этом в эффективности данной среды можно не сомневаться, благодаря ее богатству питательными веществами, удовлетворяющих потребностям требовательных микроорганизмов. Использование среды с хорошими ростовыми характеристиками – необходимый фактор для проведения теста на чувствительность микроорганизмов к антибиотикам. Среда рекомендуется также для тестирования наиболее часто встречающихся аэробных и факультативных анаэробных бактерий.
Вытяжка из говядины и казеиновый пептон (Н) в составе среды являются источниками питательных веществ, необходимых для роста микроорганизмов: азота, витаминов, минеральных солей и аминокислот. Крахмал адсорбирует все образующиеся токсические метаболиты.
Эта среда может также использоваться для культивирования Neisseria spp., причем рекомендуется инкубировать чашки в атмосфере CO2 при температуре 35±2°C 18–24 часа.
Данный агар – стандартная среда для метода Бауэра-Кирби (Bauer-Kirby), и ее применение предусмотрено Национальным комитетом клинических лабораторных стандартов (NCCLS), США.
Микробиологический тест
Следующие результаты были получены при использовании среды на тестовых культурах после инкубации при температуре 35±2°C и наблюдались через 18–24 часа.
Микроорганизмы | Диаметр ингибиторного гало в мм в соответствии с NCCLS | ||||
ампициллин, 10 мкг | тетрациклин, 30 мкг | гентамицин, 10 мкг | полимиксин B, 300 мкг | сульфаметоксазол, 1,25 мкг; триметоприм, 23,75 мкг | |
Escherichia coli ATCC 25922 | 15–20 | 18–25 | 19–26 | 12–16 | 24–32 |
Staphylococcus aureus ATCC 25923 | 24–35 | 19–27 | 19–27 | 7–13 | 24–32 |
Enterococcus faecalis ATCC 29212 | – | – | – | – | 16–23 |
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 | – | – | 16–21 | – | – |